JAMA: 再生头颈手术中使用的脂油灵的分子表征

2019-10-11 作者:陈晨 来源:晟斯医学

背景: 脂肪来源的间充质干细胞(ASC)已普遍用于再生医学,并越来越多地用于头颈外科手术。离心吸脂术被认为是提取自体移植所用的ASC的温和方法,以恢复组织缺陷或诱导伤口愈合。据我们所知,尚未针对这种方法探索ASC的含量,其旁分泌潜能以及伤口愈合中的细胞潜能。

实验目的: 评估在头颅颈部重建手术中使用的脂肪抽吸剂在伤口愈合方面的特性。

实验方法: 本案例系列研究包括15名在三级转诊中心接受外科手术过程中头部和颈部进行自体脂肪注射的患者。该研究于2017年10月至2018年11月进行,并分析了2017年10月至2019年2月的数据。检查了皮下腹部脂肪组织中过量的脂肪抽吸物。使用免疫组织化学(IHC)和流式细胞仪分析细胞组成,并通过体外脂肪,骨和软骨分化评估功能。在成纤维细胞伤口愈合试验中测试了上清液的旁分泌ASC功能。用酶联免疫吸附法测定肿瘤坏死因子(TNF),血管内皮生长因子(VEGF),基质衍生因子1α(SDF-1α)和转化生长因子β3(TGF-β3)。

实验结果: 在15名研究患者中(男性8名[53.3%];手术时的平均[SD]年龄为63.0 [2.8]岁),基质血管分数(平均[SE]为53.3%[4.2%])代表天然脂肪抽吸物中最大的部分。培养的细胞对CD73(平均值[SE],为99.90%[0.07%]),CD90(99.40%[0.32%])和CD105(88.54%[2.74%])阳性。流式细胞术中CD34(2.70%[0.45%])和CD45(1.74%[0.28%])阴性;IHC染色中CD14(每300 IHC得分10.56 [2.81])和HLA-DR(每300 IHC得分6.89 [2.97])阴性;它们分化为成骨细胞,脂肪细胞和软骨细胞。培养的细胞显示出高表达的CD44(平均值[SE],99.78%[0.08%])和CD273(82.56%[5.83%])。上清对TNF(不可检出)和SDF-1α(不可检出)呈阴性,对VEGF呈阳性(平均值[SE],526.74 [149]。84] pg / mL,用于外植体上清液;528.26 [131.79] pg / 10细胞培养上清液每天6次)和TGF-β3(外植体上清液平均[SE]为22.79 [3.49] pg / mL;细胞培养上清液每天为7.97 [3.15] pg / 10 6)。与对照组(25%或50%的间充质干细胞培养基)相比,用ASC上清液处理的成纤维细胞能更快地愈合由划痕引起的伤口(平均值[SE]:对照组,1.000 [0.160];外植体上清液,1.369 [0.070];以及传代) 6个上清液,1.492 [0.094]。

结论: 这些细胞符合间充质干细胞的国际公认标准。脂肪抽吸物含有具有增殖和免疫调节特性的多分化潜能的ASC。分离的ASC的细胞因子谱具有促进伤口愈合的功能。脂肪吸入剂可能具有再生潜力,并在头颈手术中有应用。


原始出处: Molecular Characterization of Lipoaspirates Used in Regenerative Head and Neck Surgery


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